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Fiche 37 : ZIEHL sur cytologie

Technique

Pour fixer le frottis, si besoin est, le flamber à l’alcool.

• Recouvrir la lame de Fuschine Phéniquée de Ziehl *, filtrée extemporanément sur papier. Chauffer jusqu’à émission de vapeur (sans bouillir) avec un écouvillon imbibé d’alcool que l’on enflamme et que l’on passe sous la lame. Cette manœuvre doit être effectuée avec la plus extrême précaution. Rajouter de la Fuschine si nécessaire, pour que le frottis reste couvert. Maintenir la température pendant 10 min. et rejeter le colorant. • Laver à l’eau. • Recouvrir la lame d’ Acide Sulfurique à 25% pendant 2 min. Rincer à l’eau distillée. • Recouvrir la lame d’Alcool à 95°. Laver à l’eau distillée. • Recouvrir la lame de quelques gouttes de Bleu Azur * 30 sec.

Rincer à l’eau courante puis distillée. Sécher. Monter.

Ne pas mettre dans l’alcool, mais égoutter et bien sécher à l’étuve à 60° avant de monter dans l’Eukitt.

Résultats

Bacilles acido-alcoolo-résistants rouge fuchsia Fond bleu à vert pâle Noyaux bleu foncé à bleu-vert

Réactifs

Bleu Azur Bleu Azur 1 g Phénol 1 g Eau distillée 90 ml Glycérine 12,5 ml Carbonate de lithium pour neutraliser le pH 2 à 3 gouttes

(Diluer à 2% au moment de l’emploi ; 4 gouttes dans 10 ml d’eau distillée).

Fuchsine Phéniquée de Ziehl (produit commercialisé Merck ou RAL) ou :

Préparer une solution de Phénol en mélangeant cristaux fondus de Phénol 5 ml eau distillée 95 ml Mélanger ensuite solution saturée (3%) de Fuchsine basique dans de l’éthanol absolu 10 ml solution de Phénol préparée précédemment. 90 ml

Filtrer avant usage

Remarques

La Fuchsine de Ziehl doit être filtrée et utilisée pure et chauffée. Il faut prendre un témoin positif.

 

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