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Fiche 36 : PAPANICOLAOU

Technique

Les lames doivent être fixées soit dans un mélange d’alcool-éther, soit à l’aide d’une laque fixative.

Les lames sont directement plongées dans un bain d’alcool à 80°, puis dans plusieurs bains d’eau courante.

Hématoxyline de Harris (5 min.)

• Rinçage à l’eau courante jusqu’à bleuissement des frottis (si les frottis ne bleuissent pas assez, les plonger dans une solution d’eau ammoniacale. Rincer alors à l’eau courante avant de continuer). Passer rapidement dans des bains d’alcool à 70° et 95°.

• Colorer les lames par la solution d’Orange G * (5 min.)

Passer rapidement (30 sec.) dans deux bains d’alcool à 95°.

• Colorer les lames par la solution polychrome EA50 * (5 min.)

Passer rapidement (30 sec.) dans deux bains d’alcool à 95°, puis dans deux bains successifs d’alcool absolu.

Passer dans deux bains successifs de Xylène. Monter

Résultats

Noyaux bleu-violet Cellules superficielles rose-orangé Cellules intermédiaires bleu-vert Cellules des couches plus profondes vert plus franc

Réactifs

(NB : tous ces produits sont commercialisés)

Solution d’Orange G Dissoudre : Orange G 5 g Alcool à 95° 1000 ml Ajouter : Acide phosphotungstique 0,15 g • Solution Polychrome EA50 Dissoudre : Vert lumière SF 0,375 g Brun Bismark 0,4 g Eosine Jaunâtre 2,5 g Eau distillée 50 ml Ajouter à cette solution : Ethanol à 96° 610 ml Méthanol 160 ml Acide phosphotungstique 1,7 g Carbonate de lithium (solution aqueuse saturée) 10 gouttes Acide acétique glacial 1 ml

Remarques

C’est la coloration de référence en cytologie gynécologique et dans tous les examens cytologiques de cellules épithéliales

 

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