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Fiche 34b : MAY GRUNWALD GIEMSA (MGG-histo)

Technique

Déparaffinage Bain dans l’alcool absolu (descendre les alcools) Eau Rincer à l’eau tamponnée à pH7 *

May Grünwald * en tube Borrel (20 min. à l’étuve à 37°C)

Giemsa * en tube Borrel sans rinçage (20 min. à l’étuve à 37°C)

Laisser refroidir Rincer à l’eau tamponnée Différencier à l’eau acétifiée * Passages très rapides. Rincer à l’eau tamponnée * Bain dans l’alcool acétone à parties égales

Xylènes Montage

Résultats

Noyaux rouge-violet et roses, parfois violet-bleu Cytoplasmes basophiles, éosinophiles, polychromatophiles.

Granulations des leucocytes Neutrophiles marrons Basophiles violets Eosinophiles orangés Granulations azurophiles pourpres

Granulations des Erythrocytes bleu-cobalt

Réactifs

Les deux solutions entrant dans la coloration du MGG sont difficiles à fabriquer. Elles sont de façon courante disponibles dans le commerce :
-   Giemsa (R.A.L., réf. 3-20 301, Merck, réf. 09204),
-   May-Grünwald (R.A.L., réf. 320079) Toutefois voici leurs compositions
 :

Solution de May Grünwald (M.G.) : Dissoudre progressivement 15 ml de M.G. dans 60 ml d’eau à pH7. Filtrer.

Solution de Giemsa Mélanger 5 ml de Giemsa (mélange de Romanovsky) dans 50 ml d’eau à pH7. Mélanger et Filtrer.

Tampon Eau déminéralisée 5 l Phosphate monopotassique 1 g Phosphate disodique 5 g Réajuster le pH à 6,8 avec de la soude ou du HCl fumant (goutte à goutte avec précaution).

Eau acétifiée : une goutte d’acide acétique dans 50 ml d’eau distillée

Alcool-Acétone :

Alcool absolu 50 % Acétone 50 %

 

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