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Fiche 30 : COLORATIONS pour EXAMEN EXTEMPORANE

1- BLEU DE TOLUIDINE

Technique simple, adaptée aux examens à la loupe binoculaire ou à l’Ultropak (microscope à lumière transmise) et ne nécessitant pas beaucoup de matériel.

Technique

• Colorer la surface de la tranche de la pièce, pendant quelques secondes (10 sec.) avec la solution de Bleu de Toluidine Phéniqué* (ou de Bleu de Toluidine).

• Différencier dans l’eau acétifiée (quelques gouttes d’acide acétique dans l’eau du robinet).

• Rincer à l’eau du robinet dans laquelle on peut ajouter un peu de Formol : la métachromasie rouge du stroma cancéreux « monte. »

• Examen à la loupe dans l’eau (ou à l’Ultropak dans une cuve contenant de la glycérine).

Résultats

Stroma cancéreux : rose (métachromasie), cellules tumorales : bleues

Réactifs

Bleu de Toluidine Bleu de Toluidine Phéniqué *
Bleu de Toluidine 1 g Bleu de Toduidine 59 cc
Alcool Méthylique pur 60 cc Alcool à 95° 10 cc
Eau distillée 40 cc Acide Phénique 3 g
Eau distillée qsp 100 cc

Dissoudre colorant et acide phénique dans l’alcool, ajouter peu à peu l’eau.

Tampon Walpole pH 4,2
Acide acétique à 1,2% 73 ml
Solution d’acétate de Na trihydraté à 2,7% 23 ml

Remarques

Pour les pièces déjà fixées, il faut utiliser un Bleu de Toluidine non phéniqué. (Le Bleu de Toluidine Phéniqué ne marche pas).

2- HEMATOXYLINE-EOSINE..

Elle permet une assez bonne appréciation des détails histologiques.

Technique

Récupérer la coupe sur lame. Fixer dans l’alcool à 95° pendant 1 min. (ou dans le Formol à 10%). Passage dans l’eau (de préférence distillée).

Hématoxyline de Harris : 10 à 15 sec.

Bleuir à l’eau courante

Eosine * à 1%  : 15 sec.

Eau du robinet  : 30 sec. Alcool à 95°  : 10 sec. Alcools à 100° Xylènes Montage

Réactifs

Solution mère d’Eosine

Eosine bleuâtre 3 gr Eau chaude 150 ml

On peut aussi utiliser de l’éosine bleuâtre ou de l’érythrosine.

 

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