Technique
Déparaffinage
Eau courante
• Colorer dans l’Hématoxyline ou Hemalun *
Laver à l’eau courante
• Bleuir dans une solution d’Eau Lithinée *
Rincer à l’eau courante
• Colorer dans une Solution aqueuse d’Eosine à 1% (5 à 7 min.)
Rincer rapidement à l’eau courante
Différencier dans l’Alcool à 70° puis 95°
Alcool absolu
Xylènes
Montage
Résultats
Noyaux bleus à bleus-noirs
Cytoplasmes roses à rouges
Hématies roses vifs
Collagène rose très pâle
Fibres élastiques roses vifs
Réactifs
Eau Lithinée
Mettre du carbonate de Lithium à saturation dans l’eau distillée, prêt à l’emploi (ou solution ammoniacale faible sous forme de quelques gouttes d’ammoniaque dans de l’eau).
A changer tous les jours avant chaque série.
Eosine (cf. Préambule)
Hematoxyline de Harris (cf. Préambule)
Erythrosine (cf. Préambule) ou Erythrosine Merck art 1355. A utiliser dissous à 0,5% dans de l’eau distillée.
Remarques
• Les temps de coloration sont variables :
Selon la solution employée :
Hematoxyline de Mayer 15 min
Hémalun de Mayer 5 min
Hématoxyline de Harris 5 min
Eosine aqueuse à 1% 5 à 7 min
Phloxine aqueuse à 3% 2 à 3 min
Erythrosine aqueuse à 1% 5 min
Selon la « vieillesse » du colorant : augmenter le temps de contact si le colorant est usagé et le changer le plus souvent possible.
• Il n’est pas obligatoire de bleuir la lame dans l’eau lithinée (l’eau courante suffit souvent).
